Actividad antibacteriana y citotoxicidad in vivo de extractos etanólicos de Bauhinia variegata L. (Fabaceae) / Antibacterial activity and in vivo cytotoxicity of ethanol extracts from Bauhinia variegata L. (Fabaceae)

Introducción: diversas investigaciones han identificado el potencial biológico de diferentes compuestos como flavonoides, taninos, esteroides, naftoquinonas y sesquiterpenoides presentes en el género Bauhinia. Se ha reportado para la especie Bauhinia variegata la presencia de flavonoides con propiedades antidiabéticas y antivirales; sin embargo, el estudio del potencial antibacterial y citotóxico in vivo es incipiente, tanto para compuestos de flavonoides como de alcaloides. Objetivo: determinar la actividad antibacteriana y citotóxica in vivo de los extractos alcaloidales de Bauhinia variegata L. Métodos: se aplicó cromatografía de columna para la extracción y el aislamiento de los alcaloides presentes en las hojas de B. variegata. Extractos y fracciones alcaloidales se evaluaron para determinar el potencial citotóxico por medio del bioensayo sobre "camarones de mar" (Artemia salina) y el potencial antibacterial sobre Escherichia coli por medio del método de difusión en disco (antibiograma por difusión). Resultados: se obtuvieron 6 compuestos depurados, a los cuales se les determinó la presencia del núcleo protoberberinico según espectrofotometría ultravioleta. En relación con el bioensayo sobre Artemia salina, el extracto crudo mostró menor toxicidad (CL50> 1 000 µg/mL), mientras que la fracción de los alcaloides totales y el compuesto CD1 mostró alta toxicidad (CL50< 500 µg/mL); contrario a lo evidenciado para el bioensayo antimicrobiano, porque no se presentaron halos de inhibición para los tratamientos con los extractos y compuestos utilizados. Conclusiones: la actividad citotóxica reportada se debe al efecto sinérgico del conjunto de metabolitos secundarios que pudieron evidenciarse en la planta y a los cuales también se les reconoce esta actividad (alcaloides y terpenos), que explica así la toxicidad mostrada por la fracción de los alcaloides totales.

Introduction: several research studies have identified the biological potential of different compounds such as flavonoids, tannins, steroids, naphtoquinones and sesquiterpenoid present in the genus Bauhinia. It has been reported for the species B. variegata the presence of flavonoids with anti-diabetic and antiviral properties, but the study of antibiotic and cytotoxic potential is just incipient for both flavonoid and alkaloid compounds. Objective: to determine the antibacterial and in vivo cytotoxic activity of alkaloid extracts from Bauhinia variegata L. Methods: column chromatography for extraction and isolation of alkaloids in B. variegata.leaves was performed. Alkaloid extracts and fractions were tested through bioassay for their cytotoxic potential on "brine shrimp" (Artemia salina) and the antibacterial potential on Escherichia coli through the disk diffusion method (antibiogram by diffusion). Results: six compounds were purified and measured the presence of the protoberberinic nucleus by means of UV spectrophotometry. Regarding Artemia salina bioassay, the crude extract (CE) showed less toxicity (LC50> 1000 µg/mL), whereas the fraction of the total alkaloid fraction (TA) and the CD1 compound showed high toxicity (LC50< 500 µg/mL). Unlike the evidence for the antimicrobial bioassay, no inhibition zones for treatment with the extracts and the compounds appeared. Conclusions: the reported cytotoxic activity is caused by the synergistic effect of all secondary metabolites that could occur in the plant, which were also associated with this activity (alkaloids and terpenes) that account for the toxicity shown by the total alkaloid fraction.

Evaluación de la actividad leishmanicida in vitro de extractos de Annona cherimolioides / Assessment of the in vitro leishmanicide activity of Annona cherimolioides extracts

INTRODUCCIÓN: la utilización de nuestra flora permite un acercamiento en la búsqueda de nuevas sustancias con alto nivel de bioactividad característico de la familia Annonaceae, en donde se reportan una serie de metabolitos secundarios muy promisorios para combatir estos patógenos. OBJETIVO: evaluar la actividad leishmanicida sobre amastigotes intracelulares de Leishmania (V.) panamensis y la actividad tóxica en macrófagos humanos y Artemia salina. MÉTODOS: se aplicó cromatografía de columna y cromatografía en capa preparativa para la extracción y el aislamiento de los alcaloides presentes en la corteza de tallo de Annona cherimolioides Triana & Planch. Extractos y fracciones alcaloidales se evaluaron para determinar la actividad leishmanicida por medio de citometría de flujo, además de la actividad citotóxica sobre la línea celular U937 y sobre macrófagos peritoneales de hámster. La actividad citotóxica in vivo fue evaluada sobre Artemia salina. RESULTADOS: se obtuvo un compuesto depurado, en el cual se determinó la presencia de un núcleo aporfínico según resonancia magnética nuclear 1-H y espectrofotometría. No se encontró actividad contra los parásitos de Leishmania. El extracto crudo mostró mayor toxicidad sobre Artemia salina, mientras que el compuesto depurado mostró una citotoxicidad moderada sobre la línea celular U937. CONCLUSIONES: se encontró una actividad citotóxica selectiva contra las células tumorales (línea celular U937), en comparación con la toxicidad observada en células en cultivo primario (no tumorales). Debido a la citotoxicidad mostrada sobre la línea celular U937, no se pudo determinar la concentración efectiva de los extractos contra amastigotes intracelulares, por lo que se hace necesario continuar las evaluaciones en los sistemas in vitro utilizando células no tumorales.

INTRODUCTION: the use of our flora allows a approach to search of new substances with a high level of bioactivity characteristic of the Annonaceae family where it is reported a series of secondary metabolites very promissory to attack these pathogens. OBJECTIVE: to assess the leishmanicidal activity on intracellular amastigotes of Leishmania (V) panamensis and the toxic activity on human macrophages and Artemia salina. METHODS: it was applied the column chromatography and the preparative layer chromatography for extraction and isolation of alkaloids present in the stem bark of Annona cherimolioides Triana & Planch. Alkaloid extracts and fractions were assessed to determine the leishmanicidal activity by flow cytometry as well as cytotoxic activity on the U937 cellular line and on the peritoneal macrophages of hamster. The in vivo cytotoxic activity was assessed on Artemia salina. RESULTS: a purifying compound was obtained in which the presence of an aporphine nucleus was determined by 1-H nuclear magnetic resonance and spectrophotometry. There wasn't activity against the Leishmania parasites. The crude extract showed the highest toxicity on Artemia salina whereas the purifying compound showed a moderate toxicity on the U937 cell line. DISCUSSION: there was a selective cytotoxic activity against tumoral cells (U397 cell line) compared to toxicity seen in the primary culture (non-tumoral). Due to the cytotoxicity showed on the above cell line, it was impossible to determine the effective concentration of extracts against intracellular amastigotes, thus it is necessary to continue the assessments of in vitro systems using non-tumoral cells.